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一、一抗選擇需要確定或參考的信息(一)目的蛋白的信息確定想檢測的目的蛋白是否與抗體識別蛋白信息吻合,注意中英文名字、別名等信息。某些蛋白具有多種不同的亞型,這需要在選擇抗體之前確定要研究的蛋白亞型。還有些抗體由于其抗原選擇的是不同蛋白亞型共有的肽段區(qū)域,是可以同時識別多個亞型的。有的蛋白通過剪切加工才能轉變?yōu)槌墒斓幕钚孕问?,如Caspase、Insulin等,這就需要根據(jù)研究需要,選擇針對前體或成熟形式的特異性抗體。(二)抗體制備所用抗原的信息抗體是由各種不同抗原免疫宿主而制...
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技術講堂—抗體相關知識(1)抗體(antibody)是生物體在抗原物質刺激下,由B細胞分化成的漿細胞所產(chǎn)生的、可與相應抗原發(fā)生特異性結合反應的免疫球蛋白(Ig)。按抗體的來源,可將其分為天然抗體和人工制備的抗體,是通過對特定生物體免疫接種特定抗原物質后而獲得。人工免疫動物制備的抗體應用甚為廣泛,既可以用于科學研究,也可以用于疾病的預防、診斷和治療。一、抗體的基本結構經(jīng)x線晶體衍射結構分析發(fā)現(xiàn),抗體Ig由四條多肽鏈組成,各肽鏈之間由數(shù)量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可形成“Y”字型...
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培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養(yǎng)基可根據(jù)實際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長因子。有些微生物,如自養(yǎng)型微生物,不需要碳源,所以上述物質只具有一般性。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基,較長時間的貯存,必須放在...
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酶聯(lián)免疫試劑盒的簡單介紹目前ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)方法已被廣泛應用于多種細菌和病毒等疾病的診斷。在動物檢疫方面,ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)在豬傳染性胃腸炎、牛副結核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的標準方法。自從Engvall和Perlman(1971)報道建立ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssays,ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,...
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菌種在使用和傳代過程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡,因而常常造成菌種的衰退,并有可能使優(yōu)良菌種丟失。菌種保藏的重要意義就在于盡可能保持其原有性狀和活力的穩(wěn)定,確保菌種不死亡、不變異、不被污染,以達到便于研究、交換和使用等諸方面的需要。菌種保藏是將微生物菌種采用適宜的方法妥善保藏,避免其死亡、污染,并保持其原有性狀基本穩(wěn)定的一種實驗方法,也是微生物實驗室極為重要的一項基礎性工作。甘油冷凍保藏菌種是目前實驗室應用為廣泛的一種的菌種保藏方法,原理是以甘油為保護劑,低溫冷凍條件下,使微...
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培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有水、氮源、無機鹽(包括微量元素)、碳源、生長因子(維生素、氨基酸、堿基、抗菌素、色素、激素和血清等)等。培養(yǎng)基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養(yǎng)基(如組織培養(yǎng)基),較長時間的貯存,必須放在3-6℃的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管,均改制成粉末。培養(yǎng)...
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細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。(由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系),因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞(特定環(huán)境下口語和書面語都使用),廣義是指可傳代的細胞。經(jīng)過40-50次分裂的渡過第二次死亡危機的細胞,稱之為細胞系。如細胞系的生存期有限,則稱之為有限細胞系;已獲無限繁殖能力的細胞系,稱連續(xù)或無限細胞系。無限細胞系大多已發(fā)生異倍化,具異倍體核型,可能成為惡性細胞,因此本質上已是發(fā)生轉化的細胞系。無限細胞系有永...
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NK細胞分型標志物自然殺傷細胞(Naturalkiller,NK)是細胞毒性淋巴細胞的一種類型,是天然免疫系統(tǒng)的主要組成部分。NK細胞在腫瘤和病毒感染細胞的宿主排斥反應中起重要作用。它們之所以被命名為“Naturalkiller”,是因為初認為它們不需要激活就能殺死“缺失自我識別”的細胞(“缺失自我識別”是用來描述MHC-I類細胞表面標記表達水平較低的細胞,這種情況可能是由病毒感染引起的,或者是在殺傷T細胞的強選擇壓力下發(fā)生的)。NK細胞與ILC1s(1型天然淋巴細胞)具有許...
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